La terapia génica es un tratamiento prometedor para la coroideremia, una degeneración retiniana ligada al cromosoma X. Se desconoce el nivel mínimo requerido de expresión génica para mejorar la tasa de degeneración. Esto puede ser examinado investigando la asociación entre los niveles de ARN mensajero (ARNm) y el fenotipo en pacientes levemente afectados con coroideremia. Objetivo: analizar los resultados de splicing (corte y empalme) del ARNm en el gen de la coroideremia (CHM) en 2 pacientes no relacionados con la misma variante del lugar de splicing CHM c.940 + 3delA identificada como levemente afectada por un estudio previo de pacientes con coroideremia. Diseño, entorno y participantes: en esta serie de casos de observación retrospectiva, se estudiaron 2 pacientes con variantes de CHM c.940 + 3delA tratados en un solo centro de referencia terciario. Además, un tercer paciente con una variante c.940 + 2T> A que interrumpe la secuencia de dinucleótidos canónicos en el mismo sitio donante sirvió como control positivo. Los datos fueron recopilaron desde octubre de 2013 hasta julio de 2018.
Principales resultados y medidas: El área central de la autofluorescencia residual del fondo de ojo se utilizó como biomarcador para la progresión de la enfermedad. El empalme de la transcripción de CHM se evaluó tanto por el punto final como por la reacción cuantitativa en cadena de la polimerasa. La expresión de la proteína de acompañamiento Rab 1 (REP1) se evaluó mediante inmunotransferencia.
Resultados: Los 2 pacientes levemente afectados con variantes c.940 + 3delA tenían grandes áreas de autofluorescencia residual para su edad y vidas medias de degeneración más largas comparado con la cohorte previa de pacientes con coroideremia. El paciente control con una variante c.940 + 2T> A tenía un área de autofluorescencia residual dentro del rango esperado para su edad. Ambos pacientes con la variante c.940 + 3delA expresaron niveles residuales de transcripciones de ARNm de CHM de longitud completa en relación con la transcripción truncada predominante (nivel residual medio [SEM]: paciente 1, 2.3% [0.3]; paciente 2, 4.7% [0.2 ]), equivalente a aproximadamente menos del 1% del nivel de CHM de longitud completa expresado en individuos no afectados. La expresión de CHM de longitud completa fue indetectable en el paciente control. La expresión de REP1 fue menor que el umbral para la detección tanto en los pacientes 1 y 2 como en el paciente control comparado con los controles de tipo silvestre.
Conclusiones y Relevancia: estos resultados demuestran la primera asociación genotipofenotipo en la coroideremia. Una supresión +3 en el intrón 7 es suficiente para causar una coroideremia más leve. Si se replica con la terapia génica, estos hallazgos sugerirían que una expresión relativamente baja (menos del 1%) de los niveles de ARNm de tipo silvestre sería suficiente para retrasar la enfermedad.
Autor/es: Fry LE, Patrício MI, Williams J, Aylward JW, Hewitt H, Clouston P, Xue K, Barnard AR, MacLaren RE
Traductor: OSCAR SANCHEZ NAVARRO
